顯微鏡像的質量主要取決于像的反差和像的亮度，而一定要防止在顯微鏡像中把激發光和發射的熒光混在一起。熒光顯微鏡檢術中，顯微鏡像的質量主要取決于像的反差和像的亮度，像反差是由樣品中特異染色的結構發射的熒光與本底上觀察到的光之比決定的，本底光包括透過阻擋激發光的D二濾波器的雜散激發光、組織成分的自生熒光和顯
?顯微鏡作為檢測設備的主要設備之一，而評判顯微鏡性能的重要指標是分辨率。分辨率是指能清楚地分辨兩個小點或兩線間的小距離。人眼本身就是一臺顯微鏡，在標準照明條件下，人眼在明視距離(國際公認為25cm) 上的分辨率約等于1/ 10mm。對觀察兩條直線來說，由于直線能刺激一系列神經細胞，眼睛的分辨率還能提高一些。
在光學顯微鏡無限遠校正光學系統中，由標本通過物鏡的光線不在物鏡成像，而是作為無限遠的平行光束進入成像透鏡，由成像透鏡形成中間像。而在有限遠校正光學系統中，則由物鏡單獨形成中間像。其原理如下圖所示：
