相差顯微鏡，是利用物體不同結(jié)構(gòu)成分之間的折射率和厚度的差別，把通過(guò)物體不同部分的光程差轉(zhuǎn)變?yōu)檎穹ü鈴?qiáng)度）的差別，經(jīng)過(guò)帶有環(huán)狀光闌的聚光鏡和帶有相位片的相差物鏡實(shí)現(xiàn)觀測(cè)的顯微鏡。
在觀察活細(xì)胞和未染色的生物標(biāo)本，因細(xì)胞各部細(xì)微結(jié)構(gòu)的折射率和厚度的不同，光波通過(guò)時(shí)，波長(zhǎng)和振幅并不發(fā)生變化，僅相位發(fā)生變化(振幅差)，這種振幅差人眼無(wú)法觀察。就需要用相差顯微鏡進(jìn)行觀察。
暗視野顯微鏡是利用丁達(dá)爾(Tyndall)光學(xué)效應(yīng)的原理，在普通光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上改造而成的。暗視野聚光器，使光源的中央光束被阻擋。不能由下 
而上地通過(guò)標(biāo)本進(jìn)入物鏡。從而使光改變途徑，傾斜地照射在觀察的標(biāo)本上，標(biāo)本遇光發(fā)生反射或散射，散射的光線投入物鏡內(nèi)， 因而整個(gè)視野是黑暗的。
臨床上，暗視野顯微鏡常用于檢查蒼白的螺旋體。這是一種病原體檢查，對(duì)早期梅毒的診斷有十分重要的意義。
暗視野顯微鏡常用來(lái)觀察未染色的透明樣品。這些樣品因?yàn)榫哂泻椭車h(huán)境相似的折射率，不易在一般明視野之下看的清楚，于是利用暗視野提高樣品本身與背景之間的對(duì)比。這種顯微鏡能見(jiàn)到小至4~200nm的微粒子，只能看到物體的存在、運(yùn)動(dòng)和表面特征，不能辨清物體的細(xì)微結(jié)構(gòu)。
